(19)中华 人民共和国 国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202111466645.0 (22)申请日 2021.12.0 3 (83)生物保 藏信息 CCTCC NO： M 2019 957 2019.1 1.20 (71)申请人 贵州大学 地址 550000 贵州省贵阳市花溪区松涛路 贵州大学南校区生 化工程中心 (72)发明人 康冀川　钱声艳　曾学波　钱一鑫　 卢永仲　陈丽庄　何张江　 (74)专利代理 机构 重庆强大凯创专利代理事务 所(普通合伙) 50217 代理人 张显琴 (51)Int.Cl. C07H 15/06(2006.01) A61P 35/00(2006.01)A61P 35/02(2006.01) A61K 31/7032(2006.01) C12P 19/44(2006.01) C12P 7/6463(2022.01) C12R 1/645(2006.01) (54)发明名称 一种长链脂肪酸甘油醇类化合物Rubracin E、 制备方法及其应用 (57)摘要 本申请涉及微生物技术领域中的一种长链 脂肪酸甘油醇类化合物Rubracin  E， 结构如下式 所示： 所述化合物由红棕毛筒腔菌发酵提取后获得， 所 述红棕毛筒腔菌命名为红棕毛筒腔菌Tubeufia   rubra PF02‑2， 保藏单位： 中国典型培养物保藏 中心， 保藏编号为CCTCC  NO： M 2019957。 该化合 物具有制备肿瘤耐药逆转剂或肿瘤药物增敏剂 的用途。 权利要求书2页 说明书10页 附图10页 CN 114014898 A 2022.02.08 CN 114014898 A 1.一种长链脂肪酸甘油醇类化 合物Rubraci n E， 其特征在于： 结构如下式所示： 2.根据权利要求1所述化合物的制备方法， 其特征在于： 所述化合物由红棕毛筒腔菌发 酵提取后获得， 所述红棕毛筒腔菌命名为红棕毛筒腔菌Tubeufia  rubra PF02‑2， 保藏单 位： 中国典型培 养物保藏中心， 保藏编号 为CCTCC NO： M 2019957。 3.根据权利要求2所述化合物的制备方法， 其特征在于： 包括以下步骤： 将红棕毛筒腔 菌Tubeufia  rubra PF02‑2进行液体或固体发酵培养， 得到发酵物； 将发酵物萃取， 所得萃 取物经分离纯化， 得到 长链脂肪酸甘油醇类化 合物Rubraci n E。 4.根据权利要求3所述 化合物的制备 方法， 其特 征在于： 具体包括以下步骤： S1、 菌株活化： 取出保存的菌种， 接种在基础培养基平板上， 静置培养传代至第三代后 放大培养； S2、 发酵培养： 取步骤S1活化后的菌种接种在固体培养基中， 在26～30℃下静置发酵培 养一段时间； S3、 萃取： 取菌体连同培 养基， 加入乙酸乙酯萃取， 将萃取 液浓缩后得到发酵产物； S4、 发酵产物预处理： 用氯:甲＝1:1溶剂溶解发酵产物， 再与硅胶按质量比1:1～2混合 均匀， 待溶剂挥发后作为一次上柱样品， 再与硅胶粉和石油醚上分离柱， 分别采用石油醚、 氯仿、 乙酸乙酯和甲醇依 次梯度洗脱， 洗脱溶剂经旋转蒸发仪减压回收后， 用氯仿、 丙酮或 甲醇溶解， 再用薄层层析点板， 使用展开剂展开， 选择在紫外可见光分析仪下254nm或365nm 有荧光的液体， 再用8％硫酸乙醇香草醛显色剂显色； 合并乙酸乙酯层溶剂洗脱液， 回收乙 酸乙酯溶剂， 得到乙酸乙酯层浸膏； S5、 纯化分离： a、 将乙酸乙酯层浸膏用甲醇溶剂溶解， 与硅胶按质量比1:1～3混合均 匀， 待溶剂挥发作上柱样品上预柱， 采用10％甲醇水进行平衡反相中压柱， 加入含样品预 柱， 采用甲醇水依次10个梯度洗脱， 洗脱 液经旋转蒸发仪回收溶剂后， 甲醇溶解后在用薄层 层析点板， 使用展开剂展开， 选择在紫外可见光分析仪下254nm或365nm有荧光的液体， 再合 并8％硫酸乙醇香 草醛显色剂显黑色的组分， 得到Fr.14组分； b、 将组分Fr.14用甲醇溶剂溶解后， 与硅胶按质量比1:1～3混合均匀， 待溶剂挥 发后作 上柱样品； 称取硅胶 粉与氯:甲＝ 1:1溶剂混合均匀装入分离柱中， 再加入上柱样品， 采用氯 甲系统梯度洗脱， 洗脱 液经旋转蒸发仪回收溶剂后， 甲醇溶解后在用薄层层析点板， 使用展 开剂展开， 选择在紫外可见光分析仪下254nm或365nm有荧光的液体， 再合并8％硫酸乙醇香权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 114014898 A 2草醛显色剂显黑色的组分， 得到Fr.14 ‑4组分； c、 将Fr.14 ‑4用甲醇溶解， 与硅胶按质 量比1:1～3混合均匀， 待溶剂挥发后作上柱样 品， 称取硅胶粉与氯:甲＝10:1溶剂混合均匀装入分离柱中， 再加入上柱样 品， 采用氯甲系 统梯度洗脱， 洗脱液用薄层层析点板， 使用展开剂展开， 选择在紫外可见光分析仪下254nm 或365nm有荧光的液体， 再合并8％硫酸乙醇香草醛显色剂显灰黑色的组分， 得到化合物 Rubracin E。 5.根据权利要求4所述化合物的制备方法， 其特征在于： 步骤S2的固体培养基为燕麦培 养基， 将20 0g燕麦以及15 0mL双蒸水混合后获得。 6.一种权利要求1所述的化合物及药用载体在制备肿瘤耐药逆转剂 或肿瘤药物增敏剂 中的应用。 7.根据权利要求6所述的应用， 其特 征在于： 耐药物或肿瘤药物为阿霉素。 8.根据权利要求7 所述的应用， 其特 征在于： 所述的肿瘤包括乳腺癌、 肺癌或者白血病。 9.根据权利要求6所述的应用， 其特征在于： 所述肿瘤耐药逆转剂为转运泵抑制剂， 所 述转运泵抑制剂对耐药蛋白P ‑糖蛋白和多药耐药蛋白中一种或几种具有抑制作用。 10.权利要求1所述化合物及药用载体在制备抗肿瘤细胞药剂中的应用， 其特征在于： 所述的肿瘤 细胞包括耐阿霉素乳腺癌细胞、 耐阿霉素肺癌细胞或者耐阿霉素白血病。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 114014898 A 3